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Ezb DNA/RNA/組織提取試劑盒使用注意事項(xiàng)

 更新時(shí)間:2022-07-05    點(diǎn)擊量:2166
  Ezb DNA/RNA/組織提取試劑盒通過(guò)*裂解液熱處理和蛋白酶K共同作用迅速裂解細(xì)胞釋放出基因組DNA,然后基因組DNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜,再通過(guò)一系列快速的漂洗-離心的步驟,抑制物去除液和漂洗液將細(xì)胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)去除,從低鹽的洗脫緩沖液將純凈基因組DNA從硅基質(zhì)膜上洗脫。
 
  Ezb DNA/RNA/組織提取試劑盒特點(diǎn):
 
  1.離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小,可重復(fù)性好??朔藝?guó)產(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。
 
  2.不需要使用有毒的苯酚等試劑,也不需要乙醇沉淀等步驟。
 
  3.快速,簡(jiǎn)捷,單個(gè)樣品操作一般可在30分鐘內(nèi)完成。
 
  4.多次柱漂洗確保高純度,OD260/OD280典型的比值達(dá)1.7~1.9,長(zhǎng)度可達(dá)30kb-50kb,可直接用于PCR,Southern-blot和各種酶切反應(yīng)。
 
  Ezb DNA/RNA/組織提取試劑盒注意事項(xiàng):
 
  1.所有的離心步驟均在室溫完成,使用轉(zhuǎn)速可以達(dá)到13,000rpm的傳統(tǒng)臺(tái)式離心機(jī),如Eppendorf5415C或者類似離心機(jī)。
 
  2.需要自備乙醇(需要準(zhǔn)備100%/80%/60%/40%不同濃度)或者二甲苯。
 
  3.實(shí)驗(yàn)前將需要的水浴先預(yù)熱到37℃?zhèn)溆谩?br /> 
  4.結(jié)合液CB和抑制物去除液IR中含有刺激性化合物,操作時(shí)要戴乳膠手套,避免沾染皮膚,眼睛和衣服。若沾染皮膚、眼睛時(shí),要用大量清水或者生理鹽水沖洗。
 
  5.洗脫液EB不含有整合劑EDTA,不影響下游酶切、連接等反應(yīng)。也可以使用水洗脫,但應(yīng)該確保批pH大于7.5,pH過(guò)低影響洗脫效率。用水洗脫DNA應(yīng)該保存在-20℃。DNA如果需要長(zhǎng)期保存,可以用TE緩沖液洗(10mMTris-HCl,1mMEDTA,pH8.0),但是EDTA可能影響下游酶切反應(yīng),使用時(shí)可以適當(dāng)稀釋。
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